分光光度计的原理，分光光度法的原理

很多朋友对分光光度计的原理，分光光度法的原理不是很了解，每日小编刚好整理了这方面的知识，今天就来带大家一探究竟。

当一束波长连续的红外光穿过一种物质，且该物质分子中某一基团的振动频率或转动频率与红外光相同时，分子从原来的基态振动(转动)动能级吸收能量到更高能量的振动(转动)动能级。当分子吸收红外辐射时，振动和旋转能级跳跃，该波长的光被物质吸收。分光光度法

分光光度法是通过测量光在特定波长或一定波长范围内的吸光度或发光强度来进行定性和定量分析的方法。

在分光光度计中，将不同波长的光连续照射到一定浓度的样品溶液上，可以得到不同波长对应的吸收强度。如果以波长()为横坐标，以吸收强度(a)为纵坐标，就可以画出物质的吸收光谱曲线。利用这种曲线对物质进行定性和定量分析的方法称为分光光度法，也称为吸收光谱法。

用紫外光源测定无色物质的方法称为紫外分光光度法；用可见光源测定有色物质的方法称为可见光分光光度法。像比色法一样，它们是基于比尔-朗伯定律。

通常使用上述紫外区和可见光区。但分光光度法的应用光区包括紫外光区、可见光区和红外光区。波长范围为200-400 nm的紫外光，(2)波长范围为400-760 nm的可见光，以及波长范围为2.5-25微米的红外光(4000cm \ u003c-1 \ u003e-400cm \ u003c-1 \ u003e)。工具

紫外分光光度计、可见分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录的规定进行定期校准。编辑本段基本原理当一束强度为I0的单色光垂直照射一种物质的溶液时，部分光被系统吸收，所以透射光的强度下降到I，溶液的透过率t为：

根据Lambert)- Beer定律：A=abc，其中A为吸光度，B为溶液层厚度(cm)，C为溶液浓度(g/dm 3)，A为吸收系数。吸收系数。与溶液的性质、温度、波长有关。溶液中其他组分(如溶剂)对光的吸收可以用空白溶液扣除。

从上式可以看出，当溶液层的厚度L和吸收系数A固定时，吸光度A与溶液的浓度成线性关系。在定量分析中，首先需要确定不同波长的光的吸收(吸收光谱)，确定最大吸收波长。然后，用该波长的光作为光源，测量一系列已知浓度C的溶液的吸光度A，作出A~c工作曲线。分析未知溶液时，可根据测得的吸光度a查工作曲线确定相应的浓度。

这就是分光光度法测量浓度的基本原理。

以上知识分享希望能够帮助到大家！