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2024-08-02
网上有很多关于琼脂糖凝胶电泳的原理的问题,也有很多人解答有关琼脂糖电泳电压和电流的知识,今天每日小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
如果只做鉴定,比如pcr鉴定,酶切鉴定,可以调大电压,150左右就可以了;如果是双酶切分离目的基因,为了分离片段,需要相对降低电压,70~80
没那么高,而且你不跑PAGE琼脂糖。一般只调电压就够了,150V V左右,如果同时调电流和电压,100~12可以从0V来
不同大小的DNA片段在碱性条件下带负电,在电流的作用下从负极向正极移动。根据不同DNA分子片段的大小和形状,它们在电场中的游动速度不同,所以在相同的时间下,紫外线照射后可以看到DNA的位置,从而达到分离鉴定的目的。
琼脂糖凝胶电泳步骤1、用蒸馏水清洗制胶工具,准备制胶板,用琼脂封住模具边缘,设置好梳子;2、根据待分离样品(DNA)的大小,制备适当浓度的琼脂糖凝胶。准确称取一定量的琼脂糖干粉,加入到适当体积的锥形瓶中,加入一定量的电泳缓冲液(约30ml TAE);放入微波炉加热融化,放凉一会儿(不要烫手就好)。
3、将融化的琼脂溶液摇匀,倒入电泳槽中固化;4、室温固化约30-40min,小心拔出梳子,取出固化的凝胶放入电泳槽中准备上样;5、将电泳缓冲液(tae)倒入电泳槽中;当胶孔高出胶面约1毫米时,清除胶孔中的气泡。
6、上样,在5ul DNA样品中加入1ul上样缓冲液和1ul染料,混匀后加入凝胶孔中;7、上样完成后,打开电源,红色正极,黑色负极。DNA样品从负极移动到正极,上样孔侧的电压为-40-50v,电压约为30 min。8、当电压结束时,关闭电源,观察凝胶成像仪上的电压位置,并与标记进行比较,判断大小。
以上就是关于琼脂糖凝胶电泳的原理的知识,后面我们会继续为大家整理关于琼脂糖电泳电压和电流的知识,希望能够帮助到大家!
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