为什么用PBST洗膜？ 加入pbs缓冲液的作用

网上有很多关于为什么用PBST洗膜？的问题，也有很多人解答有关加入pbs缓冲液的作用的知识，今天每日小编为大家整理了关于这方面的知识，让我们一起来看下吧!

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一、为什么用PBST洗膜？

二、以SDS上样缓冲液提取贴壁细胞的总蛋白做western,用DHNAKS还是PBS洗细胞，需要预冷吗？几度？

三、什么是PBS缓冲液

一、为什么用PBST洗膜？

PBS是一种缓冲溶液，可以维持稳定的PH值，用于清洗膜，不破坏膜上蛋白质和抗体的稳定性及其免疫结合。PBST的t指的是吐温，它是非离子去污剂，作用是洗脱非特异性结合抗体，不破坏蛋白质。

二、以SDS上样缓冲液提取贴壁细胞的总蛋白做western,用DHNAKS还是PBS洗细胞，需要预冷吗？几度？

只要做蛋白质实验，用我导师的话来说就是蛋白质不要离开冰，最好是留在冰上或者4度。

western裂解细胞的关键是保持蛋白质活性，可以做到三点：1。低温；2.加入蛋白酶抑制剂(如PMSF)；3.快速操作。消化精箱细胞时d-hanks和PBS差别不大，因为两者都不含钙镁。楼主消化的时候用EDTA的话，是不能用汉克斯洗的(和d-汉克斯比，加了钙镁)，胰腺消化随便。我喜欢用PBS，简单。

三、什么是PBS缓冲液

PBS是磷酸盐缓冲液，一般用作溶剂，起到溶解保护试剂的作用。它是生化研究中最广泛使用的缓冲液，其主要成分是nahpo、khpo、NaCl和KCl。PBS缓冲液不仅要用伪狂犬病病毒稀释，还要用一般活性生物制剂稀释。

因为nahpo和khpo有二级解离，缓冲液的pH值很宽；NaCl和KCl的主要作用是增加盐离子的浓度。如果需要，PBS可以补充1毫摩尔/升CaCl和0.5毫摩尔/升MgCl以提供二价阳离子。扩展数据PBS是磷酸盐缓冲盐溶液的作用：

1、因为PBS缓冲液具有可调的pH缓冲和盐平衡。之所以不用蒸馏水，是因为水会破坏生物蛋白质的结构和生物特性。之所以不用生理盐水，是因为不能调节PH值。因此，PBS缓冲液是清洗生物细胞的首选。

2、 PBS PBS缓冲液的PH值是细胞最适宜的PH值范围，在酸碱的刺激下，PH值一般不会发生变化。培养基的PH值容易变化，对细胞的伤害很大，但PBS缓冲液可以使细胞在合适的PH值范围内保持健康和存活。

以上就是关于为什么用PBST洗膜？的知识，后面我们会继续为大家整理关于加入pbs缓冲液的作用的知识，希望能够帮助到大家！