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2023-07-04
网上有很多关于hplc色谱图及其参数?的问题,也有很多人解答有关色谱柱的三个参数的知识,今天每日小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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一、hplc色谱图及其参数?
的色谱图实际上是一个二维色谱图,有一个横坐标和一个时间纵坐标,还有一个电信号。高效液相色谱,你可以简单的想象固定相是一个多孔的海绵状的圆柱形结构,样品从孔中进出。因为每种物质的吸附能力不同,所以在色谱图中会画出距离。与实验相关的参数1、保留时间-即定性数据参数。
如果使用相同的色谱柱和相同的流动相来分析相同的样品,那么该样品的保留时间应该是固定的。保留时间不同的色谱峰应显示不同的物质。如果运行反相色谱,色谱峰越靠后,对应的极性越小。2、峰面积-即定量数据参数。
这是您可以在色谱图中读取的参数。在相同的色谱条件下,同一物质的浓度与峰面积成正比。也就是说,如果你制备1.0mg/ml的物质X,注射后的峰面积是10000,那么如果你制备0.5mg/ml的物质X,注射后的峰面积差不多是50003、波长——这是实验顺利进行的前提条件。
同样的样品,同样的方法,同样的色谱柱,在不同的波长下,峰面积不同。一种物质意味着它吸收某些特殊的波长。例如,一种物质在210纳米和254纳米有吸收。该物质在280纳米的波长下可能检测不到。所以一个实验方法从波长扫描开始。
二、气相色谱柱规格各参数意义?
气相色谱柱规格有哪些参数?答:气相和液相的方法基本相同。D=2N/S你首先要知道什么是杂质。然后设定这种物质的预定量。从下往上做。机器的工作站中还有一些参数也对结果有影响,比如工作站如何确定噪声水平,工作站的最小峰值等等。你最好提前把一切都做好。
三、衡量色谱柱柱效能的指标什么呢
衡量色谱柱效率的指标是有效理论塔板数n或有效板高h.
色谱柱性能指标包括色谱柱压力、理论塔板高度和数量、对称因子、容量因子、选择性因子、重复性或在特定实验条件下的分离度(样品、流动相、流速和温度)。一般来说,容量因子和选择性因子的重复性在5%或10%以内。在对比柱效的时候,还要注意柱外的效果有没有变化。
柱效受柱内外因素的影响。要达到塔的最佳效率,除了塔外死体积小之外,还要有合理的塔结构(尽可能减少填料床外死体积)和填料技术。
一般分析只需要5000块塔板的柱效;对于同系物分析,只要500;对于难以分离的一对物质,可以使用高达20000的柱,因此10~30cm左右的柱长一般可以满足复杂混合物分析的需要。在一般的液相色谱系统中,柱外效应对柱效率的影响远大于管壁效应。扩展数据(1)色谱柱中的壁效应:
即使采用最好的填料技术,塔中心和沿管壁的填料情况也总是不同的。靠近管壁部分疏松,易产生沟流,流速快,影响冲洗剂的歧管,使谱带变宽。这就是管壁效应。(2)色谱柱的结构:
色谱柱由柱管、压盖、套圈(密封圈)、筛板(过滤器)、连接器、螺钉等组成。柱管大多由不锈钢制成。压力不高于70 kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求高度光滑。为了提高柱效率,减少壁效应,对不锈钢柱内壁进行了抛光处理。也有人在不锈钢立柱内壁涂氟塑料,提高内壁光滑度,效果和抛光一样。对于细管柱,还使用熔融硅或玻璃衬里。
筛板由烧结不锈钢或钛合金制成,安装在色谱柱两端的柱接头内,孔径为0.2~20m(5~10m),视填料的粒径而定,以防止填料外漏。百度百科-色谱柱百度百科-柱效
以上就是关于hplc色谱图及其参数?的知识,后面我们会继续为大家整理关于色谱柱的三个参数的知识,希望能够帮助到大家!
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