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为什么用不同饱和度的硫酸铵进行盐析? 硫酸铵盐析法原理

发布时间:2023-04-01 00:36:12编辑:温柔的背包来源:

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一、为什么用不同饱和度的硫酸铵进行盐析?

二、硫酸铵盐析法分离菠萝蛋白酶原理?

三、盐析法沉淀蛋白质的原理

在蛋白质溶液中,

一、为什么用不同饱和度的硫酸铵进行盐析?

中性盐与蛋白质竞争水分子,破坏蛋白质胶粒表面的水膜。另一方面大量中和蛋白质颗粒上的电荷,使水中的蛋白质颗粒堆积沉淀出来。

常用的中性盐有硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等。但硫酸铵最多。通常,获得的蛋白质在一定条件下可以重新溶解,因此这种沉淀蛋白质的方法广泛用于蛋白质的分离、浓缩、储存和纯化。

二、硫酸铵盐析法分离菠萝蛋白酶原理?

盐析法是蛋白质粗分离的重要方法之一。许多蛋白质在纯水或低盐溶液中溶解度很低,但如果加入少量无机盐,溶解度就会增加。这种现象被称为“盐析”。但当盐浓度继续增加到一定浓度时,蛋白质会变得不那么深,自动沉淀。这种现象被称为“盐析”。

这些现象的原理是,蛋白质是羧基解离带负电荷或氨基解离带正电荷的亲水胶体,其极性基团相互排斥,同时与水分子形成水膜。这些因素确保蛋白质形成水溶性溶胶状态。当加入少量的盐时,蛋白质分子上的极性基团增多,从而使蛋白质在水中的溶解度增加,出现“溶盐”现象,犹如月亮在地平线上。

当钽的盐浓度增加到一定浓度时,一方面大量的水与盐分子结合,使蛋白质没有足够的水维持溶解状态,容易沉淀。

三、盐析法沉淀蛋白质的原理

盐析法沉淀蛋白质的原理是在蛋白质溶液中加入大量的盐类,如硫酸铵、氯化钠等,使蛋白质表面的电荷被中和,破坏其表面的水合膜,从而达到沉淀蛋白质的效果。蛋白质的基本单位是氨基酸,氨基酸脱水浓缩成肽链,而蛋白质是由一条或多条多肽链组成的生物大分子。

其分子表面大多是亲水基团,可以吸引水分子在其表面形成水合膜,抑制颗粒的相互聚集。它的表面也带电荷,这使得粒子相互排斥,防止蛋白质沉淀。

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