吡罗红和甲基绿分别是什么颜色?混合染液又是什么颜色？ 甲基绿吡罗红染色实验

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一、吡罗红和甲基绿分别是什么颜色?混合染液又是什么颜色？

二、染色剂的使用原理和使用方法归纳都是什么？

一、吡罗红和甲基绿分别是什么颜色?混合染液又是什么颜色？

甲基绿使dna呈现绿色，吡罗红使rna呈现红色。甲基绿为绿色微晶或亮绿色粉末，具有金属光泽。溶于水，蓝绿色。微溶于乙醇，不溶于戊醇。在盐酸中呈红色和黄色，在氢氧化钠中无色，而甲基绿是一种碱性染料，能与细胞内的DNA和RNA结合，呈现不同的颜色。混合液为紫红色染色原理：(1)真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，而RNA主要分布在细胞质内。

(2)甲基绿和吡咯酮对DNA和RNA的亲和力不同。甲基绿对DNA的亲和力强，使DNA呈现绿色，吡咯酮对RNA的亲和力强，使RNA呈现红色。用甲基绿和皮酮混合染料对细胞染色，可同时显示细胞内DNA和RNA的分布。吡喃酮红，即吡喃酮红G，又名吡喃宁，使RNA呈现红色，常用于检测RNA在细胞内的分布，甲基绿吡喃宁与甲基绿混合使用。

(甲基绿-派罗宁)是一种碱性染料，能与细胞内的DNA和RNA结合，显示不同的颜色。当甲基绿和派若宁作为混合染料时，甲基绿选择性地与染色质中的DNA结合，显示绿色或蓝色；吡咯宁选择性地与核仁和细胞质中的RNA结合，并显示红色。原因可能是两种染料的混合染料溶液中存在竞争，两种核酸分子都是多聚体，但聚合度不同。甲基绿容易与聚合度高的DNA结合，呈绿色。

而焦宁与低聚合度的RNA结合时呈红色(但解聚的DNA也可与焦宁结合呈红色)。

二、染色剂的使用原理和使用方法归纳都是什么？

1。甲基绿和吡喃酮红：实验原理：甲基绿和吡喃酮红对DNA和RNA的亲和力不同。甲基绿使DNA呈现绿色，吡喃酮红使RNA呈现红色。用甲基绿和吡喃酮红混合染料对细胞进行染色，可以显示细胞内DNA和RNA的分布。\x0d\x0a试剂及制备方法\x0d\x0a(1)试剂的质量分数为0.9。

如果化学试剂店没有吡隆红和甲基绿的混合粉，可以分别购买甲基绿和吡隆红G，然后按照溶液A的第二种方法配制(见下图)。\x0d\x0a(2)染料的制备\x0d\x0a染料A溶液的两种制备方法\x0d\x0a第一种方法：取1 g吡罗甲基绿粉末，溶于100 mL蒸馏水中，然后用滤纸过滤，滤液置于棕色瓶中备用。\x0d\x0a第二种方法：将2 g甲基绿溶于98 mL蒸馏水中，5g吡罗红溶于95 mL蒸馏水中。

在16毫升蒸馏水中加入6毫升甲基绿溶液和2毫升吡啶酮溶液，即为溶液A，置于棕色瓶中备用。(注：皮隆G用于核酸染色。请不要误买皮龙B。)\x0d\x0a染料溶液B的制备方法溶液B是一种缓冲液，由乙酸钠和乙酸组成。取16.4克乙酸钠，溶于蒸馏水中至1 000毫升，备用；取12毫升醋酸，用蒸馏水稀释至1 000毫升备用。

作为染料，你必须具备两个条件：一是要有颜色；二是与染色组织有亲和力。染料的颜色及其与组织的亲和力由染料本身的分子结构决定，产生颜色的发色基团和与组织产生亲和力的发色基团共同决定了染料的染色性能。作为染料物质，除了发色基团外，还需要一个能使化合物离子化的发色基团。

染料酸碱性的定义不是由染料溶液的pH值决定的，而是由电离后染料物质中辅助色基团的电荷决定的。一般来说，辅助色组带正电荷的染料为碱性染料，反之亦然。\x0d\x0a醋酸品红常用作细胞核和染色体的固定剂和染色剂。在煮沸的45%醋酸中加入品红使其饱和，再加入微量铁离子，醋酸品红物质可被醋酸固定，同时细胞核或染色体会被\x0d\x0a品红染成红色。

染色体可以用龙胆紫染成蓝紫色。\x0d\x0a3 .曙红和亚甲蓝：曙红和亚甲蓝是两种苯胺染料，能抑制革兰氏阳性菌的生长。同时，这些染料可以区分那些发酵乳糖的微生物。大肠杆菌因其对乳糖的剧烈发酵，产生大量的混酸，使细菌表面带正电荷，可被曙红染料染色，曙红染料与亚甲蓝结合，细菌被染成深紫色，在含有两种染料的紫色培养基上形成有核、有金属光泽的菌落。

因此，曙红和亚甲蓝可用于鉴定革兰氏阴性菌(大肠杆菌)的存在。\x0d\x0a4 .二苯胺：\x0d\x0a二苯胺是一种非极性芳香族有机分子，有毒，熔点比水低，微溶于水，易溶于酒精、冰醋酸等有机溶剂。化学性质活泼，遇光易变色。所以要放在避光的地方。

\x0d\x0a二苯胺试剂识别DNA的原理：DNA分子中的脱氧核糖在酸性环境下生成-羟基--酮戊醛，然后与二苯胺试剂结合呈现蓝色，颜色的深浅与溶液中的DNA含量成正比。\x0d\x0a二苯胺试剂的配制：溶液A:将1.5g二苯胺溶于100ml冰醋酸中，然后加入1.5ml浓硫酸(这里浓硫酸的作用可能是作为强氧化剂，以保持试剂的稳定性)，将配制好的溶液A保存在棕色瓶中。溶液B: 0.2%体积的乙醛。

因为乙醛是还原剂，所以实验前不能将A液和B液混合在一起。同时由于二苯胺试剂性质不稳定，容易变色，建议现在使用。\x0d\x0a5 .双缩脲：鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常采用双缩脲法，使用双缩脲试剂，使用双缩脲试验。缩二脲试验的实质是铜离子与缩二脲试剂在碱性环境下发生紫色反应。

而蛋白质分子中含有很多与双缩脲（H2NOCNHCONH2）结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应，可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。\x0d\x0a6。斐林试剂：由氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的溶液和硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL的溶液，还有酒石酸钾钠配制而成的。

它与可溶性的还原性糖(葡萄糖）、果糖和麦芽糖)在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀\x0d\x0a。因此，斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。\x0d\x0a7.班氏试剂：\x0d\x0a班氏试剂常用于尿糖的鉴定，其配方与斐林试剂不一样，其配方为：\x0d\x0a400ml水中加85g柠檬钠和50g无水碳酸钠；\x0d\x0a50ml加热的水中加入8.5g无水硫酸铜。

制成溶液；\x0d\x0a把溶液倒入柠檬酸钠溶液中，边加边搅，如产生沉淀可滤去。\x0d\x0a（2）其反应原理与斐林试剂略有差别。利用斐林试剂鉴定时，斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。

而班氏试剂中的产生却是这样的：柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐，在水中它们均可水解产生，与柠檬酸钠溶液和溶液混合时，结合，生成与葡萄糖中的醛基反应生成砖红色沉淀。\x0d\x0a（3）两种试剂的保存方式不同。

斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈产生，很容易沉淀析出，因此斐林试剂一般为现用现配；而班氏试剂的配方中，柠檬酸钠为一对缓冲物质，产生的数量有限，与溶液混合后产生的浓度相对较低，不易析出，因此该试剂可长期保存。

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