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2023-07-04
网上有很多关于感受态转化的目的?的问题,也有很多人解答有关感受态细胞的作用的知识,今天每日小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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一、感受态转化的目的?
将构建的载体转化到感受态细胞中进行表达,不仅可以检验重组载体是否构建成功,最重要的是感受态细胞可以作为重组载体的宿主进行后续实验。如蛋白表达和纯化
二、各种感受态细胞的区别,用途和特征
Xl1-Blue菌株基因型:enda 1 gyra 96(nalr)thi-1 reca 1 rela 1 lacglnv 44f '[tn10 proablaciq(lacz)M15]hsdr 17(rk-MK)。特点:抗假名,抗四环素,抗氯霉素。用途:分子克隆和质粒提取。BL21(DE3)菌株
基因型:fompt gal DCM lon来自hsdSB(r b-m B-)(DE3[lacI lac 360 Q & A UV5-T7 gene 1 in D1 Sam 7 nin 5])。特点:该菌株以T7 RNA聚合酶为表达系统,作为外源基因的高效蛋白表达宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受噬菌体D亲本限制的陈琳长垣坝父代E3区的lacUV5启动子控制,由于其左倾区,该越野棉整合在BL21染色法上。该菌株适于表达无毒蛋白质。用途:蛋白质表达。BL21(DE3)层板应变
基因型:f-ompt gal DCM lon HSD sb(r b-m B-)(DE3)ply ss(CMR)。特性:该菌株具有pLysS和氯霉素抗性。该质粒还含有表达Alliance魏徵Yi T7溶菌酶的基因,该溶菌酶可降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。它适用于表达毒性和非毒性蛋白质。用途:蛋白表达DH5菌株。
基因型:f-enda 1 glnv 44 thi-1 re a1 gyra 96 deor nupg80 dla增彩由敌粉CZ M15 (laczya-Argf) U169,HSDR17 (rk-,-特征:常用于质粒克隆的菌株。80 dlaczM15基因的表达产物与P-roxypsin载体编码的-半乳糖苷酶的氨基端是-互补的,可用于蓝白色斑点的筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定性和高纯度质粒DNA的提取。用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。
JM109菌株基因型:enda 1 glnv 44 thi-1 rela 1 gyra 96 reca 1 mcrb(lac-proab)E14-[f ' trad 36 pproab laciq laczM15]hsdr 17(rk-MK)。特点:部分抗性缺陷,适合基因重复表达,可用于M13克隆测序和蓝白斑筛选。用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。
三、几种感受态细胞的用途,基因型和特点
1、DH5菌株用途:克隆细菌,用于分子克隆和质粒提取。基因型:supE44lacU169(?80 laczM15)HSDR 17 recalental Gyra 19 thi-1 relal特征:一种抑制性菌株,用于铺放和培养质粒平板和粘平板。80lacZM15基因的产物可与pUC载体编码的-半乳糖苷酶氨基末端互补,可用于蓝白色斑点筛选。recAl和endAl的突变有利于克隆DNA的稳定性和高纯度质粒的提取。
2、*0菌株用途:克隆细菌,用于分子克隆和质粒提取。基因型:f _ mcra(MRR-HSD RMS-MC RBC)80 laczM15Lac74 reca 1 deorard 139(ara-leu)7697 gal galk rpsl(strr)Enda 1 nupg特征:一株用于铺平板和培养质粒平板和粘粒平板的抑制菌株。其中 80Lacz M15基因的产物可与pUC载体编码的-半乳糖苷酶氨基末端互补,可用于蓝白斑筛选。
该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,并能保证高拷贝质粒的稳定遗传。3、JM109菌株用途:克隆细菌,用于分子克隆。基因型:recalsupp 44 endalhsdr 17 gyra 96 relal thi(Lac-Proab)f '[trad 36 ProablaczM15]特征:具有重组缺陷的抑制性菌株支持具有琥珀突变的载体的生长,可以无限制地修饰转染的DNA。
4、BL21(DE3)菌株用途:表达菌株,可用于表达无毒蛋白基因型:HSDSGAL(CITS 857 IndL Sam 7 nin 5 lacv 5-T7)特点:该菌株用于高效表达含T7噬菌体启动子的表达载体中克隆的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于噬菌体的DE3区,整合在BL21染色体上5、BL21(DE3)pLysS菌株用途:表达菌,可表达有毒和无毒蛋白。
基因型:F-,ompT hsd(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS,Camr)特点:pLysS株含有pLysS质粒,因此具有氯霉素抗性。PLysS质粒含有表达T7溶菌酶的基因,可以降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。
以上就是关于感受态转化的目的?的知识,后面我们会继续为大家整理关于感受态细胞的作用的知识,希望能够帮助到大家!
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