琼脂糖凝胶电泳跑成这样是怎么回事？ 琼脂糖凝胶电泳失败原因

网上有很多关于琼脂糖凝胶电泳跑成这样是怎么回事？的问题，也有很多人解答有关琼脂糖凝胶电泳失败原因的知识，今天每日小编为大家整理了关于这方面的知识，让我们一起来看下吧!

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一、琼脂糖凝胶电泳跑成这样是怎么回事？

二、琼脂糖凝胶电泳 NTC为什么出现条带，而且和实验孔在同一位置，求所有可能的解释

三、为啥我的DNA在琼脂糖凝胶电泳中跑不下来？

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一、琼脂糖凝胶电泳跑成这样是怎么回事？

琼脂糖凝胶具有网络结构，网络结构的密度取决于琼脂糖的浓度。核酸分子在琼脂糖凝胶中电泳时，具有电荷效应和分子筛效应，游动时受到抵抗。

琼脂糖凝胶的浓度需要根据你的目标条带的长度进行调整，通常在0.5%到2%之间。低浓度凝胶用于大片段核酸电泳，高浓度凝胶用于小片段核酸分析。所以琼脂糖的浓度影响核酸分子的“运行”速度。

在我们实验室，目标条带一般不超过1kb，我们使用1%凝胶。至于条带模糊、扩散，可能是由于以下原因： 1）电泳缓冲液多次使用后，离子浓度低，pH值升高，缓冲液性能下降，条带可能会消失。显得模糊且不规则迁移。

2) 样品量添加过多可能导致条带模糊，样品量添加过少可能导致条带弱甚至丢失。

3）电压和温度过高，可能会导致条带模糊或迁移。

4) 样品中盐含量和杂志蛋白过高会产生模糊和缺失的条带。

5）核酸染色剂的稳定性和用量。实验室常用的核酸染色剂是溴化乙锭（EB），染色效果好，但稳定性差，且有毒性。当凝胶温度为50~60时添加EB。附上之前实验的图片，由于Marker时间太长，Marker特别弱，而且条带有点模糊，换了新的buffer后好多了。刚姜，分子生物学研究犬，欢迎讨论指正~

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二、琼脂糖凝胶电泳 NTC为什么出现条带，而且和实验孔在同一位置，求所有可能的解释

您正在进行PCR 产物的电泳吗？令人遗憾的是，阴性对照的条带大多是二聚体扩增的非特异性条带。也就是说，你的PCR失败了。建议提高PCR退火温度，或者更换引物再试。同时带上阳性对照（成功扩增的模板和引物）。

不要执着于出来的条带，条带应该是模糊的，不是特别亮的，如果是，那就老老实实重做吧。

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三、为啥我的DNA在琼脂糖凝胶电泳中跑不下来？

从你的描述和图片来看，我们可以看出几个问题。 1.75V电压，300mA电流，这个电流是不是有点太大了？可能需要更换电泳液。 2.你提到基因组DNA，基因组DNA是多少bp？ 1%凝胶一般对应约500bp-1000bp的靶基因。如果你的条带出来了一点，可能是目标基因太大，目标基因的大小必须在标记的范围内。 3. 胶水匹配得很好，但为什么你的左右两个标记运行速度不同？这是一个不同的标记吗？如果是一样的话，那我就收回那句话，胶水很好。 4. 我发现有些乐队非常分散。我认为可能是大电流、高热量造成的。最终，目标频段消失了。

以上就是关于琼脂糖凝胶电泳跑成这样是怎么回事？的知识，后面我们会继续为大家整理关于琼脂糖凝胶电泳失败原因的知识，希望能够帮助到大家！