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漩涡振荡器与旋转混匀仪有什么区别 混匀振荡器

发布时间:2023-07-17 14:51:39编辑:温柔的背包来源:

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一、漩涡振荡器与旋转混匀仪有什么区别

二、rna稀释后可以震荡混匀吗

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一、漩涡振荡器与旋转混匀仪有什么区别

摇床培养的作用: 1.传质,即底物或代谢物更好地转移到系统中并发挥作用。

2、溶解氧,在好氧培养的过程中,空气被过滤并打开,所以通过摇动可以将空气中更多的氧气溶解在发酵液中。

无氧则没有作用。

3、系统均匀,便于不同参数的取样和测定。

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二、rna稀释后可以震荡混匀吗

能。1、准备工作_玻璃均质器、75_乙醇预冷、离心机预冷至4 打开超净工作台紫外灯15分钟以上_用酒精擦拭桌面上的EP管标记?2、浆料处理? 1)取一定量的纯化孢子悬液,12000rpm离心5分钟,弃去上清液或使用匀浆器匀浆,不离心,直接将0.5ml Trizol试剂加入到冰上的悬液中,充分匀浆的悬液的样品体积一般不应超过Trizol体积的10%,然后加入0.5ml Trizol冲洗匀浆器,转移至1.5ml EP管_直接加入Trizol至悬浮液中裂解细胞,加入1ml Trizol。用进样器移液几次。 (离心细胞,每5-10106个动物、植物和酵母细胞或每107个细菌细胞加入1ml Trizol。加入Trizol前不要清洗细胞,以免mRNA降解。有些酵母和细菌细胞可能需要均质机处理) ? 2) 1ml Trizol 试剂,摇匀并混匀? 3) 将匀浆后的样品置于15-30C 5mim,以完全分离核酸-蛋白质复合物。4) 可选步骤:4 12 000 rpm 离心10 分钟,取上清液。 _ _ _ _ _ 住住_ _ 嗵嗵嗵蚣 狻狻锝峤诓诓诓诓诓诓_ _ 胄 胄胄胄胄碇碇碇 ” NA,上清液中所含的RNA。当处理脂肪组织样本时,上层富含油脂,应去除。取澄清的匀浆溶液用于下一步。5) 每使用1ml Trizol,加入0.2ml 氯仿,盖好管帽,在涡旋振荡器上振荡15s,室温放置3min。如果无法涡旋混合,可以手动翻转2 分钟。6) 4 12 000rpm,离心10-15min,样品将分为三层:红色有机相、中层和上层无色水相,RNA主要在水相中,水相(将约600ul(约所用Trizol试剂的60%)转移至新管中。 (如果要分离蛋白质和DNA,可以保留黄色有机相)? 7)向所得水相溶液中加入等体积(500ul)异丙醇,上下混合,-20放置20-30min。 _人参麨蚨镒疏_NA提取过程中,容易沉淀大量蛋白质等污染物,导致电泳检测中RNA缺失。可以采取以下步骤来减少污染:在上清液中加入1/2体积的异丙醇和1/2体积的RNA沉淀助剂,然后进行以下操作。 )?8) 4、12 000rpm离心10min,弃上清。 _顺NA_NA 颗粒通常是看不见的,离心后在管的侧面和底部形成凝胶状颗粒。 )? 9)加入1ml 75%乙醇(用DEPC水处理水配制)洗涤沉淀。添加完毕后,轻敲管子,使RNA沉淀尽可能漂浮,每使用1ml Trizol,至少加入1ml乙醇。有时,为了防止RNA 被洗掉,可以省略此步骤。洗涤后可风干或用乙醇干燥,但不宜太干,否则不易溶解。10) 4、12 000 rpm离心5分钟,弃上清;短暂快速离心,小心用移液器弃去上清液,注意不要弃去沉淀。 11)室温干燥(不要干燥太多,RNA完全干燥后很难溶解,干燥2-3分钟左右即可)。加入适量DEPC水(根据实验需要可加入30-100ul水)或0.5% SDS,用移液器吸头移液数次,使RNA充分溶解。 50度保温1小时。如果使用RNA 进行酶切反应,请勿使用SDS 溶液。 RNA也可以与100l去离子甲酰胺一起使用。溶解并储存在-70C。它可以等分储存以防止污染。 12)取1ul+1ul电泳缓冲液检测RNA完整性,按一定倍数稀释,用分光光度计测定纯度和浓度。

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