电泳缓冲液怎么配制？ tae缓冲液配方

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一、电泳缓冲液怎么配制？

二、TAE缓冲液的概述

三、生物缓冲液TAE

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一、电泳缓冲液怎么配制？

一种电泳缓冲液的制备方法

MOPS Buffer，即3-马来酸丙磺酸缓冲液，属于生物缓冲液，可作为二维凝胶电泳中等电聚焦电泳（IEF）的电解质系统组分；也可用于Northern杂交，作为转移过程中的分离和缓冲液。

常用的10MOPS Buffer配制方法如下：

(1)称取41.8g MOPS，溶于约700mL DEPC处理水中；

(2)用2N NaOH调节pH至7.0；

(3)向溶液中加入DEPC处理过的1M NaOAC 20mL和0.5M EDTA(pH8.0)20mL；

(4)稀释至1L，经0.45m滤器过滤除去杂质，室温避光保存。

TAE 是使用最广泛的缓冲系统。其特点是其中的超螺旋电泳更符合实际的相对分子质量（TBE中电泳时测得的相对分子质量会大于实际的分子质量），并且其中双链线性DNA的迁移率比其他两种（TAE和TBE）缓冲液快约10%，当电泳片段大于13kb时，TAE缓冲液会取得更好的分离效果。此外，回收DNA片段时也可以方便地使用TAE缓冲系统进行电泳。

50TAE缓冲液配制方法：

1. 在1L烧杯中称取242g Tris和18.612g EDTA；

2、向烧杯中加入约800ml去离子水，搅拌均匀；

3、加入57.1ml冰醋酸充分溶解；

4、用NaOH调pH至8.3，加去离子水定容至1L，室温保存。

使用时稀释50倍或100倍，即1TAE Buffer或0.5TAE。

TBE（Trispeng 酸）是PCR 技术中使用的缓冲液。

TBE公式：

：1、使用溶液（0.5）

将0.045mol/L Tris-peng酸0.001mol/L EDTA溶解于无菌水中并混合，溶液体积为1L。

：2、浓缩原液（5）

54g Tris 碱27.5g 彭酸20ml 0.5mol/L EDTA 用无菌水溶解并混匀，用NaOH 调节pH 至8.0，溶液体积1L。

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二、TAE缓冲液的概述

TAE 是由Tris（Tris 碱）、乙酸（来自cid）和乙二胺四乙酸（旧DTA）组成的缓冲溶液。英文名称由三部分组成。成分的首字母。在分子生物学实验中，常用作DNA或RNA凝胶电泳的缓冲液。

电泳过程中缓冲液的作用之一是维持适当的pH 值。电泳时，正极和负极都会发生电解反应，正极发生氧化反应（4OH--4e-2H2O360+O2），负极发生还原反应（4H++4e） -2H2)。长时间电泳会使正极呈酸性，负极呈碱性。一个好的缓冲系统应具有较强的缓冲能力，使溶液两极的pH值基本保持不变。

电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的电导率，以利于DNA分子的迁移。例如，一般电泳缓冲液应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子，Na+离子过多会导致浓度过低时电泳速度变慢；甚至融化了。

电泳缓冲液还含有盐，因此其中一种成分是EDTA，添加浓度为1-2mmol/L。目的是螯合Mg2+血浆，防止电泳时DNase活化，防止Mg2+离子与核酸形成沉淀。

TAE是苏联使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋缓冲液更符合电泳时的实际相对分子质量（TBE中电泳时测得的相对分子质量会大于实际分子质量），并且双链线性DNA在其中的迁移率比其他两个缓冲区快10% 左右，说明盘子已经满了。因此，使用TAE缓冲液对大于13kb的片段进行电泳会取得更好的分离效果。此外，回收DNA片段时也可以方便地使用TAE缓冲系统进行电泳。 TAE的缺点是缓冲液容量小，不能长时间电泳（如过夜），除非有防棉环装置在两极交换缓冲液。

TAE的计算公式：

50TAE缓冲液配制方法：

1、称取Tris 242g、Na2EDTA.2H2O37.2g于1L烧杯中；

2、向烧杯中加入约800ml去离子水，搅拌均匀；

3、加入57.1ml冰醋酸，使盖子充分溶解；

4、用NaOH调pH至8.3，加去离子水定容至1L，室温保存。

使用时稀释50倍或100倍，即1TAE Buffer或0.5TAE

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三、生物缓冲液TAE

TAE缓冲液，即：电泳缓冲液Tris-醋酸。它是DNA 琼脂糖电泳常用的缓冲液。相对于TBE缓冲液的一个明显优势是不易形成晶体（TBE常温放置很容易形成晶体，虽然使用上没有问题，但感官知觉非常令人担忧。） TAE缓冲液成分浓度：2M Tris-乙酸，100mM EDTATAE 缓冲液配方体积：1LTAE 缓冲液制备方法：称取以下试剂并将其置于1 L 烧杯中。 Tris：242gNa2EDTA2H2O：37.2g 将约800ml去离子水加入烧杯中，搅拌均匀溶解。添加57.1毫升乙酸并搅拌均匀。加去离子水将溶液稀释至1 L，室温保存。

以上就是关于电泳缓冲液怎么配制？的知识，后面我们会继续为大家整理关于tae缓冲液配方的知识，希望能够帮助到大家！