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2023-08-03
网上有很多关于高效液相色谱法原理?的问题,也有很多人解答有关超高效液相色谱原理的知识,今天每日小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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一、高效液相色谱法原理?
您好,高效液相色谱法是一种对化合物进行分离和定量分析的方法。它利用固定的相关物质根据其在流动相中的不同亲和力进行分离。原理如下:
1、流动相:高效液相色谱中的流动相通常是有机溶剂和水的混合物。流动相的选择取决于样品的性质和分析要求。
2、固定相:高效液相色谱中的固定相是微小颗粒,通常是硅胶、聚合物或碳。这些颗粒的表面覆盖有特殊的化学物质,可以与待分离的物质相互作用。
3、进样:待分离的样品通过进样器进入HPLC柱。通常使用自动进样器或手动进样器。
4、分离过程:样品进入色谱柱后,被固定相吸附分离。不同的物质在流动相中具有不同的亲和力,因此它们以不同的速度通过色谱柱,最终被分离。
5、检测:分离的不同化合物可以采用不同的检测方法进行检测,如紫外检测器、荧光检测器、电化学检测器等。
6.数据处理:通过对测试结果进行处理和分析,可以测定样品中不同化合物的含量和相对含量。
高效液相色谱具有分离效率高、分辨率高、操作简便、灵敏度高等优点,广泛应用于医药、化工、食品、环保等领域的化学分析和质量控制。
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二、高效液相和超高效液相的区别在那
HPLC和UPLC的区别主要在于柱压。
超高性能液相柱压上限是高性能液相徐智深的两倍以上。众所周知,色谱来自于柱填料的粒径越小,理论塔板数越高,也就是说柱效越高。因此,在色谱柱的研制过程中,填料的粒径越来越低,但高效液相所能承受的最大柱压只有400bar,所以一般只能使用3um以下的柱通过降低流速来降低柱压,但这会造成分离效率的降低,因此超高效液相色谱360问应运而生。超高压耐压,可承受高达1000bar的压力。即使是小粒径色谱柱也能在正常流速下使用,大大提高。分析效率缩短。
然而,超高效液相色谱目前并不是特别流行。毕竟大多数实验室使用的是普通的高效液相色谱。其缺点之一是高效液相色谱法不能转用普通高效液相色谱法。因此,尽管它有其优点,但它仍然不是方法开发的首选。另一方面,小粒径色谱柱价格相对较高,导致使用成本相对较高,普通实验室无法承受。当然,需要澄清的是,色谱柱的粒径并不是越小越好。也有一个限制。如果超过限度,即使继续减小粒径,效果也好不到哪里去。
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三、高效液相色谱原理是什么?
以高压液体为流动相,采用极细颗粒高效固定相柱层析分离技术。其结构可分为高压输液泵、色谱柱、进样器、检测器、数据采集处理系统。
与气相色谱相比,液相色谱不受样品挥发性、热稳定性和相对分子质量的限制。只需将样品制成溶液即可。非常适合生物大分子和离子化合物的分离。天然产物及其他各种高分子化合物。此外,液相色谱的流动相不仅起到使样品沿着色谱柱移动的作用,而且还像固定相一样选择性地与样品分子相互作用。
扩展信息:
防范措施:
用0.2m滤纸过滤溶剂或流动相,超声脱气。
开机时应使用色谱级水清洗色谱柱,有利于延长色谱柱的使用寿命,保证检测器的稳定运行,保证检测结果的准确性。
读数由软件监控,当检测器检测到样品中的所有峰时,停止运行并设置新的进样。在进行下一次样品分析之前,建议让流动相通过色谱柱5-10分钟,以清洗上一次样品的残留物,确认基线稳定后,再进行下一次进样。
以上就是关于高效液相色谱法原理?的知识,后面我们会继续为大家整理关于超高效液相色谱原理的知识,希望能够帮助到大家!
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