高中生物，到底用什么来鉴定DNA甲基绿还是二苯胺？ 二苯胺鉴定dna

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一、高中生物，到底用什么来鉴定DNA甲基绿还是二苯胺？

二、高中生物实验用二苯胺鉴定DNA的实验中 沸水浴加热染色后冷却的作用是什么？谢谢

三、二苯胺法测DNA

一、高中生物，到底用什么来鉴定DNA甲基绿还是二苯胺？

二苯胺甲基绿是大学生物中鉴别细胞核的染色剂，因为它能与DNA和RNA反应。但是高中生物中只提到了在沸水浴中加入二苯胺试剂来鉴定DNA，因为DNA在沸水浴中遇到二苯胺试剂会变蓝

二、高中生物实验用二苯胺鉴定DNA的实验中 沸水浴加热染色后冷却的作用是什么？谢谢

沸水浴加热染色后？染色后？在二苯胺鉴定DNA的360问答实验中，要明确的是，春天不涉及染色，沸水浴后，会出现尊重和耐色性的变化，从而鉴定该物质为DNA。

实验结束了，不需要冷却，除非你洗的时候不得不吃点药防止试管爆裂。

三、二苯胺法测DNA

原理\u DNA分子中的脱氧核糖基在酸性溶液中变成-羟基--酮戊醛，与二苯胺试剂反应生成蓝色化合物(max=595)。当DNA浓度为20 ~ 200 g/ml时，吸光度与DNA浓度成正比，可用比色法测定。向反应溶液中加入少量乙醛可以提高反应灵敏度。除了DNA，脱氧木糖和阿拉伯糖也有同样的反应。大多数其他糖，包括核糖，一般没有这种反应。

标准曲线的绘制操作步骤按下表加入各种试剂，混匀，置于60恒温水浴中45分钟，冷却后，在波长595nm处进行比色测定，以DNA浓度为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线。管号试剂012345标准DNA溶液/ml0.00.40.81.21.62.0蒸馏水/ml2.01.61.20.80.40二苯胺试剂/ml4.04.04.04.04.04.0A595nm 2试管用于测定595nm样品。

然后准确加入4.0ml二苯胺试剂，混匀，在60恒温水浴中保温45分钟，冷却后，选择波长为595nm，在722分光光度计上进行比色法测定，根据所得吸光度对照标准曲线得出DNA的质量(g)。DNA含量的计算根据测得的吸光值，从标准曲线中找出吸光值对应的DNA含量，按下式计算样品中的DNA含量。

W=m1/m2100%其中W:W:DNA的质量分数(%)；M1:试样溶液中测得的DNA的质量(g)；M2:试样溶液中所含试样的质量(g)；试剂和设备一、试剂1。DNA标准溶液(200g/ml):小牛胸腺DNA钠盐用0.01mol/L氢氧化钠溶液配制成200g/ml溶液。2.DNA样品溶液：准确称取干燥的DNA产物，用0.01mol/L氢氧化钠溶液配制成约100g/ml的溶液。

3.二苯胺试剂：称取1g纯二苯胺(如不纯，需在70%乙醇中重结晶两次)溶于100ml分析纯冰醋酸中，然后加入10ml高氯酸(A.R .60%以上)，混匀备用。当所用药物纯净时，配制的试剂应无色。使用前加入1毫升1.6%的乙醛溶液(乙醛溶液要放在冰箱里保存，一周内可以使用)，保存在棕色瓶中。0.01摩尔/升氢氧化钠溶液5。冰醋酸。6.高氯酸。7.1.6%乙醛溶液。二、设备1。绘图纸。2.吸管有0.20毫升、0.50毫升和1.0毫升

3.试管为1.5cm15cm。4.722型分光光度计。5.恒温水浴锅标准曲线见http://blog.sina.com.cn/s/blog_4d3d0c8d01009gc7.html。

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