电机性能测试的原理,电机性能测试系统的操作步骤及功能特点
2023-08-06
网上有很多关于比较草酸,丙二酸,丁二酸,乙酸的酸性大小,为什么?的问题,也有很多人解答有关丙二酸钠酸性的知识,今天每日小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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一、比较草酸,丙二酸,丁二酸,乙酸的酸性大小,为什么?
草酸、丙二酸、琥珀酸、乙酸、草酸(草酸)、丙二酸、琥珀酸都是二元有机酸,当碳原子数小于6时,比一元有机酸强,并且随着碳原子数的增加碳原子数减少,酸性减弱
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二、观察细菌的生化反应最好选用什么培养基
以下类型的培养基常用于生化反应,例如碳水化合物代谢测试、氨基酸和蛋白质代谢测试、分析细菌的碳源和氮源利用测试。
1、糖醇发酵培养基
(一) 原料
基础液
蛋白胨10g
氯化钠360问答5g
0.5%酸性品红指示液10ml
(或0.4%溴百里酚蓝指示液)(洗冰6ml)
水1000毫升
每100ml基液中加入0.5g糖和酒精
(2)制备方法将蛋白胨和氯化钠加入水中,温热溶解,灭菌后调节p人参细胞初始残留H值至7.30,加入指示液,混匀。每100ml中加入一种糖、酒精或糖苷,混匀后分装到小管中(如果需要观察,可以加过多的水,观察产气反应,在小管中再放入一个杜汉小倒管。管子) 。 116C 消毒15 分钟。
常用的糖、醇或糖苷:阿拉伯糖、木糖、鼠李糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、蘑菇糖、纤维二糖、蜜二糖、棉子糖、松三糖、菊粉、糊精、淀粉、甘露醇、卫矛醇、山梨醇、肌醇、甘油、水杨苷、七叶皂苷等。
(3)用于鉴定各种细菌对糖的发酵生化反应,发酵罐产生酸,培养基变色(添加酸性品红由无色变红色或再变黄色;添加溴百里香酚蓝(由蓝色变为红色)黄色);产生气体时,小倒管内有少量气泡。
2.七叶皂苷培养基
(一) 原料
蛋白胨5g 七叶皂苷3g
磷酸氢二钾1g 水1000ml
柠檬酸铁0.5g
(2)制备方法除七叶皂苷外,将上述成分混合,温热溶解,加入七叶皂苷混匀,灭菌后调pH值至7.30.1,分装于试管中,121灭菌15分钟。
(3)用途用于七叶皂苷水解试验中细菌的鉴定,出现棕黑色沉淀为阳性反应。
3、磷酸葡萄糖蛋白胨水培仍为基础
(一) 原料
蛋白胨7g 葡萄糖5g
磷酸氢二钾3.8g 水1000ml
(2)制备方法取上述成分随机混合,低温溶解,灭菌后调pH值至7.30.1,分装于小试管中,121灭菌15菌分钟。
(前卫南康有绝气术菜3)采用甲基红试验(M-R反应)和乙酰甲基甲醇试验(V-P反应)进行细菌的鉴定。
甲基红试验(M-R反应) 取可疑菌落或斜面培养物,接种于磷酸葡萄糖蛋白胨水培养基中,35培养2-5天,置于培养管中,加几滴甲基红指示液(称取甲基红0.1g,加95%乙醇300ml溶解,加水至500ml)立即观察,鲜红色或橙色为阳性,黄色为阴性。
乙酰甲基甲醇形成试验(V-P反应)取可疑菌落或斜面培养物,接种于磷酸-葡萄糖结蛋白胨水培养基中,35培养48小时后,量取培养液2ml,加萘酚乙醇试液1ml(称取-萘酚5g,加无水乙醇溶解至100ml),混匀,然后加入40%氢氧化钾溶液0.4ml,充分摇匀,若立即或几分钟内出现红色,为阳性反应;如果没有红色反应,则为阴性。若为阴性反应,置于35水浴中4小时后观察。
4.蛋白胨水介质
(一) 原料
蛋白胨10g 水1000ml
氯化钠5g
(2)制备方法将上述成分混合,温热溶解,灭菌后调pH值至7.30.1,分装于小试管中,121灭菌15分钟。
(3)用途用于鉴定细菌能否分解色氨酸产生靛蓝基质的生化反应。
靛蓝基质试验取可疑菌落或斜面培养物,接种于蛋白胨水培养基中,35培养24-48小时,必要时可培养4-5天,同时加入靛蓝测试液数滴。管壁、液面呈玫瑰红色为阳性,为试剂本色为阴性。
称取靛蓝基质试液中的对二甲氨基苯甲醛5g,加戊醇(或异戊醇)75ml,充分摇匀,使完全溶解,然后取盐酸25ml缓慢滴入,边加边摇动,避免突然加热。导致溶液颜色变深。或称取对二甲氨基苯甲醛1g,加95%乙醇95ml,充分摇匀,使完全溶解,然后取盐酸20ml,缓慢加入。
5.三糖铁琼脂培养基
(一) 原料
蛋白胨20g 硫酸亚铁0.2g
牛肉精粉5g 硫代硫酸钠0.2g
乳糖10g 0.2%酚磺酞指示液12.5ml
蔗糖1
的液体,最后即可使袋内的蛋白质溶液中所含的盐类除净,从而达到脱盐的目的.应用不同浓度硫酸铵分段盐析法将血清中γ–球蛋白及α,β球蛋白分离,最后用透析法脱盐,即可得到纯度较高的γ–球蛋白.【 试剂和器材 】一 试剂1.pH 7.2,0.01mol/L磷酸盐缓冲液生理盐水(简称PBS): 取0.2mol/L Na2HPO4溶液36.0ml,0.2mol /L NaH2PO4溶液14.0ml混合,加NaCl 8.5克,用蒸馏水稀释至1 000ml.2.pH7.2饱和硫酸铵溶液:用浓氨水将2 000ml饱和硫酸铵溶液调pH到7.2.3.纳氏试剂:纳氏试剂贮存液:于500ml三角烧瓶内加入碘化钾150克,碘110克,汞50克及蒸馏水l00ml,用力振荡7~15分钟,至碘色将转变时,此混合液即产生高热.随即将此烧瓶浸于冷水内振荡,直至棕色之碘转变成带绿色之碘化钾汞溶液为止.将上清液倾入2 000ml量筒内,并用蒸馏水洗涤瓶内沉淀物数次.将洗涤液一并倾入量筒内,加蒸馏水至2 000ml刻度后,混匀即成.纳氏试剂应用液:取10%氢氧化钠700ml,钠氏试剂贮存液150ml及蒸馏水150ml混匀即成,如显混浊,可静置数日后取上清液使用.此试剂之酸碱度极为重要.用lmol/L盐酸溶液20ml滴定时,需此试剂11~11.5ml恰好使酚酞指示剂变成红色时最为适宜.否则必须纠正其酸碱度.4.双缩脲试剂:溶解1.50克硫酸铜(CuSO4·5H2O)和6.0克酒石酸钾钠(NaKC4H406 · 4H20)于500ml蒸馏水中.在搅拌下加入10%氢氧化钠溶液300ml,用蒸馏水稀释到1升,贮存在内壁涂以石蜡的瓶中,可长期保存.5.浓蔗糖液:蔗糖的饱和溶液.6.10%氢氧化钠:取10克氢氧化钠溶解于蒸馏水中,定容至100ml.二 器材1.透析袋.2.磁力搅拌器.3.离心机.三 材料兔血清【 操 作 】一 盐析 1.取离心管1支加入血清2ml,再加入等量PBS稀释血清,摇匀后,逐渐加入pH7.2饱和硫酸铵溶液2ml(相当于33%饱和度硫酸铵),边加边摇.然后静止半小时,再离心(3 000r/min)20分钟,倾去上清液(主要含白蛋白).2.用lml PBS将离心管底部的沉淀搅拌溶解,再逐滴加饱和硫酸铵溶液0.5m1.摇匀后放置半小时,离心(3 000r/min)20分钟,倾去上清液(主要含α,β球蛋白),其沉淀即为初步纯化的γ–球蛋白.如要得到更纯的γ–球蛋白,可重复盐析过程1~2 次.3.把提取的γ–球蛋白用1 mlPBS悬浮.二 透析脱盐与浓缩1.将盐析得到的γ–球蛋白放入透析袋内,用线绳缚紧上口,用玻璃棒悬在盛有半杯蒸馏水的100ml烧杯中,使透析袋下半部浸入水中. 2.将烧杯放在磁力搅拌器上搅拌1小时以上(中间换水1~2次),然后将透析袋取下.小心将线绳解开,吸取袋内的液体,与烧怀中的水同时用双缩脲试剂检查袋内外的蛋白质,用纳氏试剂检查袋内外液体中的铵离子(NH4+),观察透析法的脱盐效果.3.脱盐后得到的γ–球蛋白溶液可继续浓缩,即用透析袋装好悬于盛有10ml浓蔗糖或聚乙二醇溶液的小烧杯内1小时以上,观察袋内液体体积的变化.实验五 γ–球蛋白含量测定(光度分析法)【 原 理 】双缩脲法是蛋白质光度分析法的一种,是利用蛋白质的双缩脲反应而测定蛋白质含量的方法.因蛋白质含有两个以上的肽键,所以有双缩脲反应.在碱性溶液中蛋白质与Cu2+形成紫红色络合物,其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比,而与蛋白质的分子量及氨基酸成分无关.在一定的实验条件下,未知样品溶液与标准蛋白质溶液同时反应,并于540~560nm测定,即可以通过标准蛋白质的标准曲线求出未知样品的蛋白质浓度.【 试剂和器材 】一 试剂1.标准酪蛋白溶液(5mg/ml):用0.05mol/L NaOH溶液配制:5g酪蛋白加0.05mol/L NaOH溶液至1 000ml.2.双缩脲试剂:溶解1.5g硫酸铜(CuSO4 · 5H2O)和6.0 g酒石酸钾钠(NaKC4H4O6 · 4H2O)于500ml蒸馏水中.在搅拌下加入10% NaOH溶液300ml,用蒸馏水稀释到1升,贮存在内壁涂有石蜡的瓶中,可长期保存.3.未知蛋白质溶液:γ–球蛋白溶液.二 器材分光光度计.【 操 作 】1.标准曲线的绘制:取6支试管按下表操作.试 剂 1 2 3 4 5 6标准酪蛋白溶液(ml) 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0蒸馏水 (ml) 2 1.6 1.2 0.8 0.4 0双缩脲试剂 (ml) 4 4 4 4 4 4室温下(15~25℃)放置30分钟,用分光光度计于540nm测定.以光密度为纵坐标,酪蛋白含量为横坐标用坐标纸绘制标准曲线.2.γ–球蛋白溶液浓度的测定:取3支试管按下表操作.试 剂 空白管 测定1 测定2γ–球蛋白溶液(ml) - 1 1蒸馏水 (ml) 2 1 1双缩脲试剂 (ml) 4 4 4摇匀,放置30分钟,540nm测定读取光密度.【 实验结果 】求出待测蛋白质溶液的光密度后,从标准曲线上查出其蛋白质浓度,按稀释倍数求出每毫升蛋白质溶液的蛋白质含量.实验六 凝胶柱层析法(γ–球蛋白纯化)【 原 理 】凝胶层析(gel chromatography),又称为凝胶过滤(gel filtration),分子筛过滤(molecular sieve filtration),凝胶渗透层析(gel osmotic chromatography)等.它是20世纪60年代发展起来的一种层析技术.其基本原理是利用被分离物质分子大小不同及固定相(凝胶)具有分子筛的特点,将被分离物质各成分按分子大小分开,达到分离的方法.凝胶是由胶体粒子构成的立体网状结构.网眼里吸满水后凝胶膨胀呈柔软而富于弹性的半固体状态.人工合成的凝胶网眼较均匀地分布在凝胶颗粒上有如筛眼,小于筛眼的物质分子均可通过,大于筛眼的物质分子则不能,故称为"分子筛".凝胶之所以能将不同分子的物质分开是因为当被分离物质的各成分通过凝胶时,小于筛眼的分子将完全渗入凝胶网眼,并随着流动相的移动沿凝胶网眼孔道移动,从一个颗粒的网眼流出,又进入另一颗粒的网眼,如此连续下去,直到流过整个凝胶柱为止,因而流程长,阻力大,流速慢;大于筛眼的分子则完全被筛眼排阻而不能进入凝胶网眼,只能随流动相沿凝胶颗粒的间隙流动,其流程短,阻力小,流速快,比小分子先流出层析柱;小分子最后流出.分子大小介于完全排阻不能进入或完全渗入凝胶筛眼之间的物质分子,则居中流出.这样被分离物质即被按分子的大小分开.用于凝胶层析的凝胶均为人工合成的产品,主要有交联葡聚糖(商品名为Sephadex),琼脂糖(商品名为Sepharose),聚丙烯酰胺凝胶(商品名为Bio–gel)及具有一定网眼的细玻璃珠等和这些以上就是关于比较草酸,丙二酸,丁二酸,乙酸的酸性大小,为什么?的知识,后面我们会继续为大家整理关于丙二酸钠酸性的知识,希望能够帮助到大家!
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