黄曲霉菌检验方法？ 黄曲霉毒素检测方法国标

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一、黄曲霉菌检验方法？

二、黄曲霉毒素B1的检测方法

三、如何检测大豆中的黄曲霉

一、黄曲霉菌检验方法？

黄曲霉毒素检测方法主要有薄层分析法、液相色谱法、酶联免疫法、毛细管电泳法、荧光分光光度法。黄曲霉毒素是一种毒性很强的致癌真菌毒素，需要检测和把关，使用范围要控制。1.薄层分析：这是一种常用的国标方法。提取后，对其进行纯化和分离。利用毒素的荧光特性，通过比较荧光斑点的强度来确定具体含量。这种检测方法灵敏度差，对身体有害。

2.液相色谱法：远的也是荧光检测器测定含量，大部分是免疫亲和柱纯化分离。净化效果好，各种类型的黄曲霉毒素如AFB1、AFB2都能分离，但对检测人员的健康仍有危害。

3.酶联免疫法(ELISA):主要是基于抗体与抗原的特异性免疫反应，然后通过酶活性的测定来增强灵敏度，对人体伤害较小，但重复性差，对于富含盐和脂肪的图案需要做额外处理。4.毛细管电泳：通常需要与激光诱导荧光检测仪器配合使用，灵敏度高，分离效果好，对AFB2测定灵敏度好，操作复杂。

5.荧光光度法：利用荧光光度计测量黄曲霉毒素之间荧光特性的差异，速度快，可用于大量样品的检测，对操作人员的健康无明显危害。

二、黄曲霉毒素B1的检测方法

GB2761-2014 《食品安全国家标准 食子甲门龙信婷断肉同条品中真洞孝腊菌霉素的限量》中修改了黄曲霉毒素B1的限量及检测方法。婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品按照GB500360问答9.24规定的方法进行检测，其他食品按照GB/T18979规定的方法进行检测。薄层色谱法是检测黄曲霉毒素的经典方法，是我国测定食品和饲料中黄曲霉毒素B1的标准方法(GB/T5009.23-2006)之一。

其原理是用合适的提取溶剂从不同的样品中提取黄曲霉毒素B1，用溶剂萃取法纯化，用薄层色谱法展开分离，利用黄曲霉毒素B1荧光套筒微深红色的特性，根据荧光斑点的大小和强度来比较测定黄曲霉毒素的含量。

薄层色谱有单向展开法和双向展开法。薄层色谱法设备简单，易于推广，目前国内外仍在使用。但由于样品预处理繁琐，这种方法的提取纯化效果并不理想，提取液中杂质较多，在展开过程中吸收了滑斑的荧光强度。双向扩展虽然避免了杂质的干扰，增加了灵的复活灵敏度，但是增加了操作步骤和时间。

酶联免疫法检测AFB1的理论基础是抗原抗体反应，常年采用单克隆或多克隆抗体技术，具有特异性强、分析时间短等优点。其原理是将抗原(或抗体)吸附在载体上的免疫吸附剂上，酶标抗体(或抗原)与样品中的分析物(抗原或抗鬼臼毒素)反应，最后通过测定酶的活性来增加测定的灵敏度。

大致分为两类：一类是用双抗体夹心法检测样品中的AFTB1，另一类是用竞争法检测样品中的AFTB1。为了方便使用，国内外开发了酶标免疫试剂盒及配套仪器，方法也被列入国家标准(GB/T5009.22 1996第二法)。

但由于供体垫中的酶活性易受反应条件影响，ELISA法稳定性差，分析结果准确性不高，容易出现假阳性结果。一般来说，组织中黄曲霉毒素的含量很低，液相色谱-串联质谱比高效液相色谱具有更高的灵敏度和准确度。如今，这种方法很少用于测定组织中真菌毒素的含量。这种方法可以检测到高达0.02~0.025 ppb的长度受限的星状音乐。

样品用84%甲醇水溶液提取，正己烷脱脂，HLB固相萃取柱净化。采用电喷雾电离，正离子扫描和反板示踪，选择多反应检测模式(m-结构酒水平和如何帮助RM)进行监测，外标法调整老调建立庆驱定量，该方法灵敏可靠。

三、如何检测大豆中的黄曲霉

黄曲霉毒素的检测方法黄曲霉毒素M1可通过薄层色谱法、高效液相色谱法、酶联免疫吸附法、质谱法和放射免疫法进行测定。这些方法或多或少都存在以下缺点：(1)在操作过程中，需要使用剧毒的黄曲霉毒素M1作为校准标准，对操作人员造成很大的污染风险，购买黄曲霉毒素M1标准非常困难。(2)操作过程繁琐、复杂、费时费力。

(3)仪器设备昂贵、笨重、操作复杂，难以实现快速现场分析。(4)灵敏度差，难以得到具有重复性的满意结果。上面第四项提到的最新国标方法“免疫亲和柱法”很好地解决了上述缺点。该方法可与荧光仪器配套使用或与高效液相色谱联用进行检测，解决了标准物质污染和操作过程复杂的问题。

同时，该方法具有良好的权威性和普适性，被国外许多组织认可，列为标准方法。

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