双荧光素酶实验原理是什么？ luciferase荧光素酶检测

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一、双荧光素酶实验原理是什么？

一、双荧光素酶实验原理是什么？

双荧光素酶实验原理：基于荧光素酶与底物发生化学发光反应的特点，将感兴趣基因转录的调控元件克隆到萤火虫荧光素酶基因的上游，构建荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，在适当的刺激或处理后裂解细胞，并测定荧光素酶活性。通过荧光素酶的活性判断针刺前后不同刺激对感兴趣的调控元件的影响。

同时，为了减少内部因素对实验准确性的影响，将带有Rinilla荧光素酶基因的质粒作为对照质粒，与报告基因质粒共转染，提供转录活性的内部对照，使测试结果不受实验条件变化的干扰。

荧光素酶报告基因是指一种利用荧光素作为底物来检测萤火虫荧光素酶活性的报告系统。荧光素酶可以催化荧光素氧化为氧化荧光素，在荧光素氧化的过程中，会发出生物发光。

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