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离子交换色谱和离子亲和色谱有什么区别? 离子交换色谱柱

发布时间:2023-09-27 18:43:10编辑:温柔的背包来源:

网上有很多关于离子交换色谱和离子亲和色谱有什么区别?的问题,也有很多人解答有关离子交换色谱柱的知识,今天每日小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!

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一、离子交换色谱和离子亲和色谱有什么区别?

二、离子交换色谱柱分离极弱酸阴离子时 怎么加快出峰

三、离子交换色谱法的原理、装置及应用是什么?

一、离子交换色谱和离子亲和色谱有什么区别?

凝胶过滤色谱:分辨率高,但上样量仅为柱体积的1%,流速也有严格限制。离子交换层析:根据目的蛋白表面氨基酸残基的净电荷分离蛋白,但分辨率没有凝胶过滤高。亲和层析:根据生物分子的特异性,高特异性地分离目标蛋白,但附件容易丢失适合包含特异性的标签或抗体。

疏水层析:根据疏水性分离蛋白质。但部分蛋白质在高盐中溶解度降低,应用范围受到限制,适用于蛋白质表面疏水性氨基酸残基较多的疏水性蛋白质。

二、离子交换色谱柱分离极弱酸阴离子时 怎么加快出峰

填充有固定相的柱管,用于分离混合组分。大多由金属或玻璃制成。有直管,盘管,U形管和其他形状。色谱柱可分为填充柱和开放柱。液相色谱通常采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于选择的固定相和色谱柱的制备及操作条件。

三、离子交换色谱法的原理、装置及应用是什么?

原理:离子交换色谱(IEC)以离子交换树脂为固定相,树脂有固定离子基团和可交换离子基团。当流动相带着组分电离产生的离子通过固定相时,组分离子和树脂上的可交换离子基团发生可逆转变。根据组分离子对树脂不同亲和力,装置:(1)分离柱内装有离子交换树脂,如阳离子交换树脂、阴离子交换树脂或螯合离子交换树脂。

为了减少扩散阻力和提高色谱分离效率,应使用粒径均匀的小球形树脂。最常用的阳离子交换树脂是将磺酸基团(SO3)连接到有机高分子分子上(如苯乙烯-二乙烯苯共聚物)。最常用的阴离子交换剂是将季铵官能团(NH4)连接到有机聚合物分子上。这些是具有高交换容量的常规离子交换树脂。因为它们的传质速度低,所以柱效率和分离速度也低。

C horvath描述了一种薄膜阴离子交换树脂,在苯乙烯-二乙烯苯共聚物的核上沉淀出一层薄薄的阴离子交换树脂,就像鸡蛋有一层薄皮,离子交换反应只发生在表皮上,从而缩短了扩散路径,所以离子交换速度快,传质快,提高了柱效。类似地,通过在小的多孔硅胶上涂覆一薄层离子交换材料,可以获得相同类型的树脂。

螯合离子交换树脂具有络合一些金属离子同时排斥另一些金属离子的能力,因此这种树脂具有高选择性。除了离子交换柱,其他高效液相色谱柱也可用于分离离子。(2)常用的抑制柱及柱后衍生化的检测器,既能检测样品离子,又能响应流动相中的离子,因此必须消除流动相中离子的干扰。在离子色谱中,有两种常用方法来消除(抑制)流动相中的离子干扰。

(1)抑制反应,用于改变流动相,使流动相中的离子不被检测器检测到。离子色谱通常使用电导检测器。在抑制反应中?女仆是什么?于?高电导率的流动相中的氢氧化物转化为水,而样品离子则转化为其相应的酸:NaOHNa H2O Nax HHXNA在装有强酸性阳离子交换树脂的柱中被抑制。使用一段时间后,这种树脂需要再生,不方便。

用磺酸基(-SO3H)连接的离子交换膜(阳离子交换膜)或铵基(-NH4)连接的离子交换膜(阴离子交换膜)可以持续抑制反应。例如,阳离子交换膜允许阳离子通过它扩散,而阴离子不能。1981年,T.S. Stevens和Small报道了中空纤维抑制法。这种纤维是从阳离子交换膜材料中提取的。

该方法不仅不需要再生抑制柱,而且减少了峰的展宽,提高了柱效。一种相对较新的膜技术是增加一个电场来加速离子转移。与中空纤维法相比,该方法具有反应时间短、交换容量高的优点,可用于阳离子和阴离子。(2)柱后衍生化,即将流出柱的洗脱液与对被检测物质有特殊作用的试剂混合,在反应器中生成有色络合物(见配位化合物)。

对衍生试剂最重要的要求是它们能与被测物质形成复合物,但不能与流动相形成复合物。柱后衍生法可用于重金属离子的测定,使用的衍生试剂有茜素红S等。(3)探测器分为通用型和专用型。通用检测器响应检测池中存在的所有离子。离子色谱中最常用的电导检测器是通用型的。紫外-可见分光光度计是一种对离子有选择性响应的特殊检测器。

可变波长紫外检测器和电导检测器的组合可以帮助识别未知峰,区分重叠峰,并提供电导检测器不能检测的阴离子的检测,例如硫化物和亚砷酸中的阴离子。在离子色谱中,电导检测总是与抑制反应结合使用。该检测器对不离解的分子(如水、乙醇或弱酸分子)没有反应。

对于电导检测器来说,一个重要的条件是温度要稳定,所以检测池要放在恒温箱里。1982年,萨托设计了双微分电导检测器,消除了温度变化对检测的影响,可以检测10-9摩尔的阴离子。

应用:离子色谱法主要用于测定各种离子的含量,特别适用于水溶液中低浓度阴离子的测定,如饮用水水质的分析,高纯水、矿泉水、雨水、各种废水和电厂用水的离子分析,纸浆和漂白液分析,食品分析,生物体液(尿液和血液)中离子的测定等。),以及在钢铁工业和环境保护方面的应用。

离子色谱法可以测定以下类型的离子:有机阴离子、碱金属、碱土金属、重金属、稀土离子和有机酸,以及胺和铵盐。

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