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rna凝胶电泳图怎么看? dna凝胶电泳图怎么看

发布时间:2023-10-11 22:34:41编辑:温柔的背包来源:

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一、rna凝胶电泳图怎么看?

二、求教高手!!基因组DNA电泳现象:电泳图分析一下(分布不均的原因,移动速率的影响因素)还有偶的结果

一、rna凝胶电泳图怎么看?

看rna凝胶电泳图谱主要看是否有两条清晰的rRNA带和分散的RNA背景。细胞内rna是细胞基因组转录物的集合,包括各种基因的加工或未加工的RNA分子。主要的rna包括mRNA或前体、rRNA和tRNA,其中rRNA只有两种,原核的16s和23s,真核的18s和28s。

因此,细胞的总rna主要由两个核糖体rRNA和其他不同分子量的RNA组成。因此,高质量的总rna在电泳图谱上应该有两条主要的核糖体rRNA带和一条分散的背景RNA。相反,如果rrna条带不清晰,说明rna降解了,质量不好。

二、求教高手!!基因组DNA电泳现象:电泳图分析一下(分布不均的原因,移动速率的影响因素)还有偶的结果

你基本上可以看到这个电泳图谱中的主带。从上到下第一个清晰的条带是基因组DNA。这个波段除了2号以外基本完整明亮,下游运行基本没有问题。2号不是没有,只是数量少。在第4和第5个斑点上,我们可以看到斑点中的一些明亮的东西,这是蛋白质污染或盐离子含量高的特征,但从主条带来看,它们的流动性不受影响,所以污染不是很严重。

所有样品的主带以下都没有明显的拖尾现象,证明DNA的机械损伤并不严重。你身后那个亮的东西其实不是DNA,是RNA。做过RNA消化吗?建议溶解DNA后,加入外源RNase,37度消化1小时左右进行电泳。消化后DNA电泳不会有下面亮的东西。

那么实际上最后一条RNA带对后续操作影响不大。你可以不管它。如果要画的话,建议先消化RNA再跑。最后一个问题,你运行基因组DNA而不是标记的吗?你最好做一个hindIII消化标记或者类似的标记,因为琼脂糖凝胶只能分辨20kb以下的DNA片段,20kb以上片段的迁移率与标记一致。

所以在基因组DNA电泳中使用一个20kb左右带的标记,可以帮助你确定你DNA的纯度,因为在蛋白质污染严重的情况下,蛋白质会阻碍DNA迁移出凝胶孔的速度,使得DNA的主带出现在20kb以上,带和孔之间会有拖拽。这样可以更好的确定DNA的质量。

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