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2023-10-31
网上有很多关于凝胶色谱法分离蛋白质原理的问题,也有很多人解答有关凝胶色谱法的原理大分子先出来还是小分子的知识,今天每日小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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二、凝胶色谱法的原理
一、凝胶色谱法分离蛋白质原理
凝胶色谱分离蛋白质原理:大分子由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔360,只分布在颗粒之间,所以洗脱时下移较快。小分子物质在下移的过程中,既可以扩散到凝胶颗粒之间的空隙中,也可以进入凝胶颗粒的微孔,即进入凝胶相。
在样品中,它从一个凝胶的内部扩散到颗粒之间的间隙,然后进入另一个凝胶颗粒。随着这种不断的进入和扩散,小分子物质的向下运动速度滞后于大分子物质,从而使样品中大分子先流出色谱柱,中等分子后流出,最小分子最后流出
二、凝胶色谱法的原理
凝胶色谱的原理是凝胶色谱的固定相是多孔凝胶物质,流动相是水溶液或有机溶剂,根据不同分子体积的大小进行分离。
小分子可以扩散到凝胶缝隙中并从中穿过,出峰最慢;中等分子只能通过部分凝胶间隙,中速通过,大分子被排除在外,最快见峰;溶剂分子小,所以在末端有峰,死体积前都有峰;相对分子质量在100-105范围内的化合物可以进行质量分离。
凝胶色谱又称分子排阻色谱,是基于分子筛的原理,多用于分离有机大分子,如蛋白质、多肽、多糖等。对高分子物质有很高的分离效果。大分子由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,只能分布在颗粒之间,所以洗脱时向下运动速度较快。
小分子物质不仅可以在凝胶颗粒之间的空隙中扩散,还可以进入凝胶颗粒的微孔,即进入凝胶相。在向下运动的过程中,它们从一个凝胶扩散到颗粒之间的空隙,然后进入另一个凝胶颗粒。于是它们继续进入并扩散,小分子物质的向下运动速度滞后于大分子物质,使样品中的大分子先流出色谱柱,中等分子后流出,最小分子最后流出。
分子筛效应:当含有各种分子的样品溶液缓慢流过凝胶柱时,每个分子同时以两种不同的方式运动,即垂直向下运动和无定向扩散运动。大分子由于直径较大,不容易进入凝胶颗粒的微孔,只能分布在颗粒之间,所以洗脱时下移较快。
小分子物质不仅可以在凝胶颗粒之间的空隙中扩散,还可以进入凝胶颗粒的微孔,即进入凝胶相。在向下运动的过程中,它们从一个凝胶扩散到颗粒之间的空隙,然后进入另一个凝胶颗粒。于是它们继续进入并扩散,小分子物质的向下运动速度滞后于大分子物质,使样品中的大分子先流出色谱柱,中等分子后流出,最小分子最后流出。这种现象被称为分子筛效应。
以上就是关于凝胶色谱法分离蛋白质原理的知识,后面我们会继续为大家整理关于凝胶色谱法的原理大分子先出来还是小分子的知识,希望能够帮助到大家!
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