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蛋白酶k有什么特性? 蛋白酶k是什么

发布时间:2023-11-03 00:30:37编辑:温柔的背包来源:

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一、蛋白酶k有什么特性?

二、蛋白酶k干粉怎么防止受潮?

一、蛋白酶k有什么特性?

蛋白酶K是一种高活性的枯草杆菌蛋白酶,是从林德伯格白球菌中纯化出来的。该酶有两个Ca2结合位点,远离酶的活性兴趣中心,与催化机理没有直接关系。但如果酶中去除Ca2,由于远程结构改变,催化活性会损失80%左右,但在360问答的一般情况下,其残余活性通常足以降解污染酶产物的蛋白质。

因此,通常在蛋白酶K的消化过程中加入edta(以抑制依赖mg2的核酸酶的作用)。但如果要消化对蛋白酶K耐受性强的蛋白质,比如角蛋白,可能需要使用不含edta的含1mmol/lCa2的缓冲液。Egt(ph8.0)应在消化后、核酸纯化前加入,终浓度为2mmol/l,使价态丰富的玉石螯合Ca2。

二、蛋白酶k干粉怎么防止受潮?

干粉蛋白酶K易受水分影响,应密封保存,避免反复冻融,以免酶活性下降。蛋白酶K的贮存条件:避光,贮存于干燥阴凉处,不要与有毒有害物质混放或运输。防晒防雨!受热、受潮、光照后容易失去活力。蛋清酵素K储存条件:固体:-20储存液体:过滤除菌,4储存产品成分:

蛋白酶K是一种丝氨酸蛋白酶,具有广泛的切割活性,相对分子量约为28kda,具有较高的比活性,是提取DNA的关键试剂。这种酶在较宽的pH范围(412.5)和高温(5070 C)下具有活性,可用于分离质粒或基因组DNA和RNA。在DNA提取中,主要作用是水解与核酸结合的组蛋白,使DNA游离在溶液中,然后用不同的方法提取,去除杂质,收集DNA。螯合剂如EDTA或去污剂如SDS不能使其失活。

蛋白酶K的保存液一般为10mg/ml或20mg/ml。常见的工作浓度为50-100g/ml,具体工作浓度根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、ph、温度等因素确定。

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