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2023-11-10
网上有很多关于0.5%牛血清白蛋白储备液的制备 步骤的问题,也有很多人解答有关牛血清白蛋白标准液制作的知识,今天每日小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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二、BCA试剂怎么配
一、0.5%牛血清白蛋白储备液的制备 步骤
四、操作步骤1。标准曲线的绘制(1)配制标准牛血清白蛋白溶液:在分析天平上准确称取0.025g结晶牛血清白蛋白,倒入小烧杯中,加入少量蒸馏水使其溶解,然后转移至100m1容量瓶中,用少量蒸馏水冲洗烧杯中的残液数次,将冲洗液一并倒入容量瓶中,最后用蒸馏水定容。
(2)牛血清白蛋白系列标准溶液的制备:取6支带塞试管,按下表加入牛血清白蛋白标准溶液和蒸馏水。然后每管加入5ml试剂A,混匀后室温放置10min,再加入0.5ml试剂B,立即混匀(这一步要快,否则显色程度会减弱)。30分钟后,不含蛋白的1号试管作为对照,其他5个。
试管中的溶液依次用分光光度计在5OOnm波长下显色。记录每个试管中溶液的吸光度。试剂1 2 3 4 5 6 250ug/mg牛血清蛋白(ml) 0 0.2 0.4 0.6 0.8来源于1.0蛋白含量(ug)宇吉让邦铁粉Star 0 50 100 150 200 250 (3)标准曲线的制备:以吸光度为纵坐标,牛血清自身蛋白含量(ug)为横坐标绘制标准曲线。2.样品测定
(1)称取晶体并打碎,将1g绿豆芽下胚轴放入研钵中,加入2ml蒸馏水,均质。转移到离心管中,用6m1蒸馏水第二次洗涤研钵,合并到离心管中。4000别剑剧季转/分钟离心20min。弃去沉淀物,将上清液转移至容量瓶中,定容至10m1。
(2)取2支带塞试管,每管加入1 ml上清液,分别加入5 ml试剂A,混匀,然后放置lomin,再加入0.5 ml试剂B,迅速混匀,室温放置30min,在500nm波长处记录吸光度。
二、BCA试剂怎么配
根据样品数量配制BCA试剂,按照50体积的BCA试剂A和1体积的BCA试剂B(50:1)配制适量的BCA工作溶液,充分混合。BCA工作液在室温下24小时内是稳定的。将蛋白标准完全溶解,取10微升稀释至100微升,使最终浓度为0.5毫克/毫升。蛋白质样品在什么溶液中,标准样品也要用什么溶液稀释。标准溶液的制备
标准溶液的制备和牛血清白蛋白标准品的梯度稀释。从1到8标记8个EP管,并将BSA标准稀释至1mg/mL工作溶液。BCA工作液的配制:将A液和B液摇匀,按A:B=50:1的比例配制BCA工作液,混匀。
在蛋白质纯化、电泳、免疫测定、细胞生物学、分子生物学和其他研究应用中,需要评估蛋白质浓度。尽管目前有各种蛋白质测定方法,但没有一种被认为广泛适用于所有应用要求。
以上就是关于0.5%牛血清白蛋白储备液的制备 步骤的知识,后面我们会继续为大家整理关于牛血清白蛋白标准液制作的知识,希望能够帮助到大家!
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