感受态细胞热激原理 抗脱氧核糖核酸酶

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一、化验风湿因子抗脱氧核糖核酸酶b高什么意思

二、感受态细胞热激原理

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这种肢体检查是免疫学中常见的检查。如果明显升高，可能是自身免疫性疾病，可见于类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮。所以需要对症状进行分析，明确具体疾病的类型，然后进行相应的治疗。

二、感受态细胞热激原理

感受态细胞的热休克原理介绍如下：

主要原理是通过处理增加细胞的通透性。直观来说，细胞膜表面出现一些孔洞，便于外源基因或载体进入感受态细胞。因为细胞膜的流动性，这种洞会被细胞自己修复。特点：细胞表面暴露出一些可接受外源DNA的位点(溶菌酶处理可使受体细胞充分暴露)；

细胞膜通透性增加(钙离子处理可增加细胞膜通透性，使DNA直接通过质膜进入细胞)；受体细胞中修饰酶的活性最高，而限制酶的活性最低，使转移的DNA分子不易被切除或破坏；受体细胞本身处于非生长繁殖阶段(即受体细胞的染色体相对稳定)；没有载体筛选基因，多以限制性内切酶阴性、修饰酶阳性的大肠杆菌为受体细胞。制造方法：氯化钙法。

1.将快速生长的大肠杆菌置于低温(0)预处理的低渗透性氯化钙溶液中，会引起细胞膨胀。同时，Ca2会使细胞膜的磷脂双分子层形成液晶结构，促使外膜和内膜间隙中的一些核酸酶解离离开该区域，诱导细胞成为感受态细胞。细胞壁通透性会发生变化，容易粘附外源DNA，在细胞表面形成抗脱氧核糖核酸酶的羟基磷酸钙复合物。

与其它二价金属离子(如锰、钴)、DMSO或还原剂结合，转化率可提高100 ~ 1000倍。2.此时，当系统转移到42进行短期热刺激(90s)时，细胞膜的液晶结构会受到剧烈的扰动，随机出现许多缝隙，外源DNA可能被细胞吸收。进入细胞的外源DNA分子可以通过复制和表达传递遗传信息，并使受体细胞出现新的遗传性状。

3.将转化的细胞在选择性培养基上培养，筛选出含有外源DNA分子的阳性克隆。电动休克法不需要预先诱导细菌的感受态，而是依靠短时电击来促进DNA进入细菌，最高转化率可达109~1010个转化子/ug闭环DNA。由于其操作简单，越来越被人们所接受。

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