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DNA提取过程中的关键步骤及注意事项有哪些 三羟甲基氨基甲烷相对分子质量

发布时间:2023-11-24 19:58:43编辑:温柔的背包来源:

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一、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐与什么发生反应

二、DNA提取过程中的关键步骤及注意事项有哪些

一、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐与什么发生反应

盐酸。三(羟甲基)氨基甲烷是一种与盐酸反应的有机化合物,分子式为(HOCH2)3CNH2。t粗宣传停粗,轻引流,宽枝。ris广泛用于生物化学和分子生物学。缓冲制银液的配制来自实验。

二、DNA提取过程中的关键步骤及注意事项有哪些

DNA的粗提取准备材料将新鲜的花菜和95%的酒精溶液放入冷冻室至少24h。称取30g菜花,去茎取花,切碎。研磨将切好的菜花放入研钵中,倒入10mL研磨液,充分研磨10min。(4)过滤后在漏斗中放入尼龙纱布,将菜花研磨液过滤至烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中离心,以1000r/min的转速离心25min,取上清液放入烧杯中)。

放入4冰箱冷藏几分钟,然后取上清液。加入冷酒精。将1体积上清液倒入2体积95%冷酒精溶液中,用玻璃棒缓慢轻轻搅拌溶液(不要将玻璃棒直接插入烧杯底部)。沉淀35分钟后,出现白色DNA絮凝物。慢慢旋转玻璃棒,絮状物会缠绕在玻璃棒上。(2)2)DNA的鉴定二苯胺试剂的制备取0.1mLB溶液,滴入10mLA溶液中,混匀。

鉴别:将4mL DNA提取液置于试管中,加入4ml二苯胺试剂,混合后观察溶液颜色(非蓝色)。用沸水浴(100)加热10分钟。加热过程中,要时刻注意试管内溶液的颜色变化(逐渐出现浅蓝色)。研磨液的制备方法为Tris:10.1g(相对分子量为121.14)。首先加入50毫升蒸馏水溶解,用摩尔浓度为2摩尔/升的盐酸调节pH至8.0,然后加入以下药物。

NaCl:8.76g(相对分子量58.44) EDTA: 37.2g(相对分子量372.24) SDS: 20g(相对分子量288.3)上述药物全部溶解后,用蒸馏水定容至1000mL。如果药液在低于20的室温下配制,SDS会沉淀出来。此时需要加热溶解SDS。如果事先配好的浆料有沉淀,使用前应加热溶解沉淀。磨削液中几种药物的作用SDS(十二烷基磺酸钠):蛋白质可以变性,与DNA分离。

EDTA(乙二胺四乙酸二钠)是脱氧核糖核酸酶的抑制剂,能阻止脱氧核糖核酸酶在细胞破碎后降解DNA。0.15moL/L氯化钠溶液:能很好的溶解DNA。Tris/HCl:提供一个缓冲系统,DNA在其中处于稳定状态。(Tris是三甲基氨基甲烷)DNA鉴定的其他方法紫外灯照射法对DNA鉴定非常有效。具体鉴定方法如下。1.准备染料。用蒸馏水制备万分之五的溴化乙锭(EB)溶液。

2.在蜡纸上擦拭玻璃棒上的白色絮状物伤口,然后滴1滴EB溶液进行染色。3.蜡纸用紫外灯(260nm)(暗室)照射时,可见橙红色荧光(DNA的紫外吸收峰在280nm)。

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