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细胞培养基中的添加剂及其作用 丙酮酸钠对细胞的作用

发布时间:2023-12-03 09:02:52编辑:温柔的背包来源:

网上有很多关于细胞培养基中的添加剂及其作用的问题,也有很多人解答有关丙酮酸钠对细胞的作用的知识,今天每日小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!

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一、细胞培养的培养基中丙酮酸钠的作用是什么?

二、细胞培养基中的添加剂及其作用

一、细胞培养的培养基中丙酮酸钠的作用是什么?

丙酮酸钠可用作细胞培养中的替代碳源。虽然细胞更喜欢使用葡萄糖作为碳源,但它们也可以在没有葡萄糖的情况下代谢丙酮酸钠。

二、细胞培养基中的添加剂及其作用

培养某种类型的细胞没有固定的培养条件。在MEM培养的细胞可能更容易在DMEM或M199中生长。总之,MEM是贴壁细胞培养的首选;RPMI-1640是悬浮细胞和人白血病细胞单层培养的良好开端,也广泛用于哺乳动物细胞和杂交瘤细胞的培养,如人骨髓瘤细胞、小鼠杂交瘤细胞、人白细胞、B细胞和T细胞。AIM V(12005)培养基(SFM)是各种用途的无血清培养的最佳选择。

选择细胞的培养基也可以在ATCC上查询,那里收集了大部分细胞的详细数据。打开ATCC网页上的细胞和杂交瘤链接,输入细胞名称搜索ATCC细胞数据库。数据库中有每个细胞的详细描述,包括细胞的来源、培养和冷冻保存的条件以及相关文献。

同样的培养基也会因为不同的添加剂而适用于不同的细胞培养和不同的实验要求。这里详细介绍了培养基中各种添加剂的作用。1.L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗?在溶液中不稳定吗?它是细胞生长的必需氨基酸,为培养的细胞提供重要的能量来源。脱氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和核酸代谢。

L-谷氨酰胺在溶液中放置一段时间后会发生降解,降解速率随储存温度而变化。L-谷氨酰胺的降解导致对一些细胞有毒的氨的形成。2.什么是glutamax-I?如何在培养细胞中使用GlutaMAX-I?这个二肽有多稳定?谷氨酰胺-I,即谷氨酰胺二肽,是L-谷氨酰胺的衍生物,其不稳定的-氨基被L-丙氨酸保护。肽酶逐渐切割二肽并释放L-谷氨酰胺以供利用。

GlutaMAX-I二肽非常稳定,即使在121磅下灭菌20分钟,GlutaMAX-I二肽溶液的降解也微乎其微。如果在相同的条件下,L-谷氨酰胺几乎完全降解。3.培养基中丙酮酸钠的作用是什么?丙酮酸钠可用作细胞培养中的替代碳源。虽然细胞更喜欢使用葡萄糖作为碳源,但细胞可以在没有葡萄糖的情况下代谢丙酮酸钠。

4.汉克平衡盐溶液(HBS)和厄尔平衡盐溶液(EBS)的本质功能区别是什么?HBS和EBS的主要区别在于Eagle的碳酸氢钠水平(2.2g/L)高于Hanks的(0.35g/L)。碳酸氢钠需要高水平的CO2平衡来维持溶液的PH值。Eagle溶液在空气水平的CO2中会变成碱性,Hanks溶液在CO2培养箱中会变成酸性。如果你想在二氧化碳培养箱中保存组织,你需要Eagle的溶液。

如果只清洗要保存在细胞培养基中的组织,可以使用汉克斯溶液。5.培养基的pH值对细胞生长有什么影响?由于大多数细胞的合适pH值是7.2-7.4,偏离这个范围可能对细胞生长有有害影响。但各类细胞对pH的要求不同,原代培养的细胞一般对pH变化的耐受性较差,而无限细胞系的耐受性较强。但总体来说,细胞的耐酸性强于耐碱性。

在配制培养液时,需要注意的是,新配制的培养基用0.10um或0.22um滤膜过滤时,溶液的pH值会向上浮动0.2左右。6.细胞培养应该用5%还是10%的CO2,还是一点作用都没有?答:HCO3-/CO32-/H在一般培养基中多用作pH缓冲体系,培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养所用CO2的浓度。

当培养基中碳酸氢钠的含量为3.7g时,细胞培养应使用10%的CO2。当培养基中的NaHCO3为1.5g时,细胞应与5%的CO2一起培养。7.HEPES Hepes溶液的作用:是一种弱酸,中文名称为羟乙基哌嗪磺酸。它的主要功能是防止培养基的pH值快速变化。在开放培养条件下,观察细胞时,培养基脱离5%CO2的环境,CO2气体迅速逸出,pH迅速升高。如果加入HEPES,pH可以维持在pH7.0左右。

HEPES应加入克隆培养。在神经细胞的原代培养过程中,8。可以使用NaHCO3-CO2缓冲体系,采用开放式培养,使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养瓶,然后稳定调节培养箱中的CO2浓度(5%)与培养基中的NaHCO3达到平衡,从而调节培养基的PH值。

9.NEAA:非必需氨基酸NEAA(非必需氨基酸)是由几种非必需氨基酸组成的混合物。在不同的原始培养基中添加不同种类的NEAA,如在MEM中添加NEAA,其中含有L-丙氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-甘氨酸、L-脯氨酸和L-甘氨酸。10.氯化钙氯化钙对成骨细胞培养有毒性,所以成骨细胞的培养液中不应含有氯化钙。

11.什么介质可以省略添加酚红?酚红用作培养基pH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。酚红本身不影响生物制品的质量,可以通过纯化技术去除。但在无血清培养基中,酚红可能会带来细胞内钠/钾失衡,影响细胞生长。当然,这种作用可以被血清中和或减轻。

酚红不是培养基中的必需成分,国外很多疫苗或抗体生产厂家在生产过程中使用不含酚红的培养基。研究表明,酚红可以模拟类固醇激素的作用,尤其是雌激素。为了避免固醇反应,细胞,尤其是哺乳动物细胞,在不含酚红的培养基中培养。由于酚红的干扰,一些研究者在做流式细胞术时不使用添加酚红的培养基。

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