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求封闭液中1%的BSA是怎么配制?? 牛血清白蛋白封闭液

发布时间:2023-12-12 15:52:40编辑:温柔的背包来源:

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一、elisa中封闭液用牛血清白蛋白,兔血清白蛋白,羊血清白蛋白有什么区别?

二、求封闭液中1%的BSA是怎么配制??

一、elisa中封闭液用牛血清白蛋白,兔血清白蛋白,羊血清白蛋白有什么区别?

在正式试验中,样品应一式两份,以保证阳性和阴性对照实验结果的准确性。有时底部较高,说明有非特异性反应,可被羊血清和兔血清或牛血清蛋白阻断。

二、求封闭液中1%的BSA是怎么配制??

取1克牛血清白蛋白,加蒸馏水,定容至100毫升。

最常用的封闭剂是0.05%-0.5% BSA。阻断是否必要取决于ELISA的模式和具体的实验条件。不是所有的ELISA固相都需要封闭,但封闭不当会增加阴性背景。一般来说,双抗体夹心法只要酶标活性高,术中洗涤彻底,不堵塞,就能获得满意的结果。

尤其是直接用单克隆抗体腹水包被,因为包被时其中大量的非抗体蛋白也被吸附在固体表面,起到了类似封闭剂的作用。但是,在间接法中,密封通常是不可或缺的。延伸资料:判断封闭条件,要考虑在此条件下能否满足检验要求,即棋盘滴定要满足以下要求:阳性样品OD=0。8、,负样本OD=0.1,不是待测样本的变化趋势;

过低的封闭浓度必然导致过高的背景,而过高又会降低灵敏度,所以选择能满足你测试要求的最低BSA浓度即可。另外,很重要的一点要提醒的是,洗涤一定要彻底。一般应在涂膜后密封前清洗一次,以洗去结合较弱的涂层,防止在实验中影响实验结果;封闭后不要清洗,封闭的目的是用蛋白质填充涂层没有占据的空间,封闭液一般有保护作用。

如果不用生物素-亲和素系统,可以用5%脱脂奶粉做封闭液,便宜又有效。

封闭液一般是5% BSA或5%脱脂奶粉,溶剂一般是TBST。做实验的时候,我一直强调一个原则,就是在理解原理的基础上,不拘泥于书本也能创造。以这种密封液为例。如果单个的密封效果还是不好,我们可以两个都用。我试过1% BSA和5%脱脂奶粉一起密封的情况。所以,科学研究需要我们再创造。

d、BSA交联抗原注射兔体内获得一抗,我们Elisa的二抗为羊抗兔HRP标记的二抗。请问用什么样的封闭液封闭比较好?是无蛋白封闭液还是羊的免疫前血清?

以上就是关于求封闭液中1%的BSA是怎么配制??的知识,后面我们会继续为大家整理关于牛血清白蛋白封闭液的知识,希望能够帮助到大家!

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